3.1.3 Структурно-функциональная сохранность лейкоцитов, перенесших воздействие температуры переохлаждения (–10°С) разной продолжительности в криоконсервирующих растворах №2, №4, №6
Дальнейшие исследования были посвящены определению максимального срока хранения лейкоцитов при –10°С в хладоограждающих растворах №.2, 4 и 6, которые в лучшей степени, чем остальные способствуют сохранению устойчивости мембраны к витальному красителю эозину, а также значительному проценту гранулоцитов и фагоцитарноактивных нейтрофилов после отогрева. Раствор №7 в дальнейших исследованиях не использовали, т. к. концентрация ингредиентов в нем выше, чем в растворе №6 (табл. 2.2.1).
Установлено (табл. 3.1.3.1), что при нахождении лейкоцитов крови человека в хладоограждающем растворе №2 при температуре переохлаждения –10°С абсолютное и относительное число клеток не изменялось через все сроки хранения (5-14 суток), количество эозинорезистентных лейкоцитов после 12 суток падало ниже 80% от исходного уровня. Уровень гранулоцитов (рис. 3.1.3.1) через все сроки хранения составлял более 80%. В сравнении с исходным 100% уровнем после 7 суток нахождения лейкоцитов при –10°С в растворе №2 снижались (р<0,05) способность нейтрофилов к фагоцитозу (рис. 3.1.3.2) и количество нейтрофилов, содержащих катионные белки. Число диформазан-положительных клеток через 5 суток хранения статистически значимо увеличивалось по сравнению с исходным уровнем.
При хранении лейкоцитов в хладоограждающем растворе №4 при –10°С (табл. 3.1.3.2) после 5 суток экспозиции снижались (р<0,05): абсолютное и относительное число клеток, количество эозинорезистентных лейкоцитов (рис. 3.1.3.3), число нейтрофилов, способных к фагоцитозу, количество нейтрофилов, содержащих катионные белки (рис. 3.1.3.4). Число диформазан-положительных клеток увеличивалось по сравнению с исходным уровнем после 7 суток хранения.
Таблица 3.1.3.1 Показатели лейкоцитов (М±σ), перенесших воздействие температуры переохлаждения (–10°С) в хладоограждающем растворе №2 в течение 14 суток
Сроки хране-ния, сутки | n | Показатели | ||
до охлаждения | после отогрева | после отогрева в % от уровня до охлаждения | ||
1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
Количество лейкоцитов в 1 мкл | ||||
5 | 7 | 13100±4808 | 12100±3473 | 96,1±2,1 |
7 | 9 | 11400±2686 | 10260±2459 | 94,2±8,7 |
9 | 10 | 12400±4686 | 11160±4239 | 93,2±5,7 |
11 | 7 | 11800±2286 | 10960±3459 | 94,6±5,5 |
12 | 6 | 12400±4632 | 11840±2678 | 92,6±5,7 |
14 | 7 | 13310±4771 | 11160±4145 | 95,2±4,8 |
Количество эозинорезистентных лейкоцитов в % | ||||
5 | 7 | 96,5±0,7 | 90,5±8,4 | 89,1±9,8+ |
7 | 9 | 95,8±4,0 | 85,8±13,0* | 91,1±8,9+ |
9 | 10 | 96,8±1,0 | 80,1±13,9* | 86,9±11,2+ |
11 | 7 | 98,3±1,1 | 82,8±18,5* | 91,4±4,7+ |
12 | 6 | 99,0±1,4 | 81,3±4,6* | 81,3±4,6+ |
14 | 7 | 99,0±1,0 | 56,2±7,8* | 56,6±7,8+ |
Количество гранулоцитов в % | ||||
5 | 7 | 24,0±1,4 | 22,2±2,0 | 93,0±6,9+ |
7 | 9 | 15,4±7,4 | 17,0±1,4 | 83,6±5,8+ |
9 | 10 | 18,5±0,7 | 16,1±2,1 | 88,0±9,3+ |
11 | 7 | 13,3±2,1 | 11,6±2,9 | 81,7±5,5+ |
12 | 6 | 18,0±7,1 | 13,0±3,3 | 82,2±3,6+ |
14 | 7 | 14,0±1,7 | 13,2±3,3 | 81,4±4,5+ |
Количество фагоцитарноактивных нейтрофилов в % | ||||
5 | 7 | 42,9±5,1 | 38,5±5,7 | 94,7±4,3 |
7 | 9 | 48,8±10,0 | 47,8±8,7 | 94,8±4,8 |
9 | 10 | 43,2±1,1 | 30,2±4,4* | 76,6±5,0+ |
11 | 7 | 49,3±12,1 | 34,0±3,7* | 75,5±9,8+ |
12 | 6 | 41,5±2,1 | 32,7±2,7* | 75,7±4,3+ |
14 | 7 | 57,2±11,5 | 29,9±4,6* | 52,9±6,1+ |
Продолжение таблицы 3.1.3.1.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 |
