На основании полученных данных сделано заключение об отсутствии «хронической токсичности» у криозащитных растворов №4, №9, №13 и №20.
3.5.2.3 Изучение пирогенности эффективных хладоограждающих растворов №4, №9, №13 и №20
Определение пирогенных свойств хладоограждающих растворов проводили в соответствии с методикой XII-ой Государственной Фармакопеи РФ (2007) на кроликах-неальбиносах (для каждого раствора по три животных), которым внутривенно вводилась тест-доза 6,6 мл определенного хладоограждающего раствора в конечной концентрации на кг массы тела кролика. Во всех случая сумма максимального отклонения температуры кроликов не превышала допустимый предел в 1,4°С, что свидетельствует об отсутствии пирогенных свойств у хладоограждающих растворов №4, №9, №13 и №20 (табл. 3.5.2.3.1).
3.5.2.4 Изучение переносимости экспериментальными животными трансфузий концентрата аутологичных лейкоцитов, замороженных с эффективными хладоограждающими растворами №4, №9, №13 и №20
У беспородных собак (по 3 животных для каждого раствора массой 14,3±4,0 кг) проводили забор крови в количестве равном 1% массы тела животного для получения аутологичного лейкоцитного концентрата путем цитафереза (центрифуга ЦР-3, 2000 об/мин, 7 мин). Полученный лейкоцитный концентрат смешивали со стерильным хладоограждающим раствором в конечной концентрации в соотношении 1:1 в пластикатном контейнере «Компопласт 300», выдерживали эту смесь при комнатной температуре в течение 20 минут и замораживали по соответствующему разработанному методу с раствором №4 до –10°С, №9 до –20°С, №13 до –40°С, №20 до –80°С. До замораживания и после отогрева считали лейкоциты в камере Горяева и определяли число эозиноустойчивых клеток. Во всех случаях достоверных отличий не выявлено.
Таблица 3.5.2.3.1 Испытание эффективных хладоограждающих растворов №4, №9, №13 и №20 на пирогенность
№№ кро- ли-ка | Подготовка кроликов к испытанию | Испытание на пирогенность | ||||||||||
1 день | 2 день | 3 день | 4 день | 5 день | Исх. t0C | Вес (г) | Кол-во введ. р-ра | Изменение температуры через | Сумма макс. откло- нения | |||
Вес (г) | Вес (г), t0C | t0C | Вес (г), t0C | 1 час | 2 час | 3 час | ||||||
Введение хладоограждающего раствора №4 | ||||||||||||
123 | 2320 | - | 2370/39,1 | 39,2 | 2410/39,3 | 39,4 | 2370 | 15,6 | 39,8 | 39,8 | 39,7 | +1,1 |
124 | 2800 | - | 2860/39,4 | 39,4 | 2890/39,3 | 39,5 | 2800 | 18,2 | 39,7 | 40,0 | 40,0 | +1,2 |
125 | 2550 | - | 2560/39,2 | 39,1 | 2580/39,2 | 39,4 | 2500 | 16,5 | 39,4 | 39,7 | 39,4 | +0,3 |
Введение хладоограждающего раствора №9 | ||||||||||||
4 | 2820 | - | 2850/39,4 | 39,3 | 2940/39,1 | 39,3 | 2840 | 18,7 | 39,0 | 39,3 | 39,5 | -0,1 |
5 | 3300 | - | 3360/39,2 | 39,5 | 3380/39,3 | 39,5 | 3300 | 21,7 | 39,4 | 39,6 | 39,3 | -0,2 |
101 | 3290 | - | 3350/39,2 | 39,1 | 3380/39,3 | 39,4 | 3290 | 21,7 | 39,3 | 39,2 | 39,3 | -0,4 |
Введение хладоограждающего раствора №13 | ||||||||||||
26 | 2320 | - | 2380/39,4 | 39,2 | 2480/39,0 | 39,0 | 2480 | 16,3 | 38,8 | 38,8 | 39,1 | -0,3 |
27 | 2800 | - | 2880/39,1 | 39,3 | 2920/39,0 | 39,0 | 2900 | 19,1 | 38,8 | 39,0 | 39,0 | -0,2 |
28 | 2410 | - | 2470/39,4 | 39,2 | 2590/39,0 | 39,0 | 2580 | 17,0 | 39,0 | 39,3 | 39,4 | +0,7 |
Введение хладоограждающего раствора №20 | ||||||||||||
1 | 2530 | - | 2540/39,0 | 39,0 | 2570/39,0 | 39,0 | 2570 | 16,9 | 39,2 | 39,3 | 39,2 | +0,7 |
2 | 2600 | - | 2590/38,9 | 39,0 | 2650/39,0 | 38,9 | 2640 | 17,4 | 39,3 | 39,0 | 39,0 | +0,6 |
3 | 2350 | - | 2380/39.0 | 39,0 | 2400/39,1 | 39,0 | 2400 | 15,8 | 39,3 | 39,3 | 39,1 | +0,7 |
После размораживания аутологичных лейкоцитных концентратов осуществляли их внутривенные трансфузии животным со скоростью 30 капель в минуту.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 |
