Комбинированные криоконсерванты в сохранении функций лейкоцитов (стр. 13 )

При изучении фагоцитарной способности нейтрофилов (рис. 3.2.2.1) установлено, что хладоограждающие растворы №9 и №11 способствуют восстановлению данной функции соответственно у 75,7±7,9% и 76,0±12,9% клеток (от исходного уровня) после отогрева.

Следовательно, по большинству показателей хладоограждающий раствора №9, содержащий в исходной концентрации ГМБТОЭМ - 28%, ОМЭПС - 0,15% и бидистиллированную воду до 100 мл проявляет лучшие криозащитные свойства в условиях субумеренно-низкой температуры (–200С) в течение 1 суток.

Исследование содержания в нейтрофилах активированных кислородных метаболитов (АКМ) с помощью НСТ-теста показало, что у нейтрофилов, находящихся в хладоограждающем растворе №9 в течение 1 суток при -200С наблюдается существенное повышение содержания АКМ. Если исходное количество НСТ-положительных клеток составляло 19,7±5,6% (М±σ; n=7), то после размораживания оно повысилось и составило 52,3±10,6%, т. е. увеличивалось примерно в 2,6 раза.

Установлено, что под защитой хладоограждающего раствора №9 после размораживания через 1 сутки отмечалось тенденция к увеличению численности популяции Т-лимфоцитов (86,2±7,6%; М±σ, n=5) в сравнении с уровнем до замораживания (75,0±8,4%). Вероятно, это связано с повышением активности антигенспецифических рецепторов Т-лимфоцитов, вызванной воздействием холодового стресса. Количество В-лимфоцитов достоверно не изменялось: исходно - 8,7±2,7% (М±σ, n=5), после отогрева 6,7±2,5%, следовательно, эта популяция лимфоцитов при данных условиях проявляет большую стабильность.

Также установлено, что содержание растворенного в среде кислорода через 1 сутки данного холодового воздействия не изменяется по сравнению с исходным (до замораживания) уровнем (рис. 3.2.2.3).

Рисунок 3.2.2.3 Содержание растворенного кислорода в лейкоцитных концентратах (ЛК; n=10) и в их смеси с криопротекторным раствором (КР) №9 до и после экспозиции при –20°С в течение 1 суток

3.2.3 Структурно-функциональная сохранность лейкоцитов, перенесших воздействие субумеренно-низкой температуры (–20ºС) разной продолжительности в криоконсервирующем растворе №9

На основании того, что хладоограждающий раствор №9 в лучшей степени обеспечивает сохранность лейкоцитов при -20°С в течение 1 суток при его использовании было проведено изучение морфо-функциональных показателей клеток через следующие сроки холодового воздействия - 14, 21, 28, 42, 56, 70, 80 и 90 суток.

Установлено (табл. 3.2.3.1), что абсолютное и относительное число клеток статистически значимо (р<0,05) снижается через 80 суток экспозиции при –20°С в растворе №9. Количество эозинорезистентных лейкоцитов после 28 суток падает ниже 90% от исходного уровня. Достоверное снижение количества гранулоцитов после отогрева происходило также спустя 28 суток и способствовало повышению относительного количества лимфоцитов и моноцитов. Количество нейтрофилов, способных к фагоцитозу (рис. 3.2.3.1) при воздействии субумеренно-низкой –20°С температуры 21 сутки оставалось на уровне выше 70% от исходного. Число нейтрофилов с темно-синими гранулами восстановленного формазана увеличивалось через 1-28 суток в 2,5-3 раза.

Таблица 3.2.3.1 Показатели лейкоцитов (М±σ; n=7), перенесших воздействие субумеренно-низкой температуры (–20°С) в хладоограждающем растворе №9 в течение 90 суток

Продолжение таблицы 3.2.3.1.

Примечания. * - различие со значением до замораживания p<0,05; + - различие с исходным 100% уровнем p<0,05.

Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27