В помещении, в котором исследуется воздух, чашки открываются на 5 минут (крышку класть на стерильную бумагу не переворачивая).
Выращивание посевов.
Посевы на ДП – температура 20-250С, выдержка 5-7 сут.
На КМАФАнМ – температура 300С, выдержка 3 сут.
Анализ водопроводной воды.
Требования к питьевой воде согласно СанПиНу 2.1.4.1074-03 по микробиологическим показателям:
КМАФАнМ не более 50 в 1 см3
Коли - титр не менее 333 см3
Коли - индекс не более 3
Титр кишечной палочки – это наименьшее количество продукта (исследуемой воды в см3/гр.), в котором обнаружена кишечная палочка.
Индекс кишечной палочки – количество бактерий группы кишечный палочек, содержащихся в 1 литре исследуемой воды.
Отбор проб.
Кран обжечь горящей спиртовкой. Открыть, спустить воду в течение 10 минут. После этого в стерильную колбу набрать 500 см3 исследуемой воды.
Анализ воды.
Вода исследуется на общую бактериальную обсемененность и на наличие бактерий группы кишечных палочек.
Исследование питьевой воды на общую бактериальную обсемененность производят по питательным средам:
КМАФАнМ – питательная среда для определения количества мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов.
МПА – мясопептонный агар.
Исследование питьевой воды на наличие бактерий группы кишечных палочек производят по питательным средам:
ГПС – глюкозопептонная среда;
Кесслер - питательная среда для определения БГКП.
Методика посева питьевой воды.
На КМАФАнМ - с соблюдением правил стерильности в стерильную чашку Петри наливается 1 см3 питьевой воды и примерно 10 см3 среды КМАФАнМ. Круговыми движениями руки равномерно распределить среду по дну чашки Петри и оставить до застывания.
Бродильная проба воды.
Титр кишечной палочки определяют по ГПС. Для анализа берется 3 стерильных колбы и 6 стерильных пробирок.
Количество среды, см3 | Количество исследуемой воды, см3 | |
1 колба | 10 | 100 |
2 колба | 10 | 100 |
3 колба | 10 | 100 |
3 пробирки | 1 | 10 |
3 пробирки | 1 см3 + 9 см3 стерильного физ. раствора | 1 |
Общий объем воды 333 см3
Выращивание посевов.
Посевы на ГПС – температура 370С, выдержка 24 час.
На КМАФАнМ – температура 300С, выдержка 3 сут.
Схема организации микробиологического контроля питьевой воды и воздуха на гормолзаводах, маслодельно-сыродельных и молочноконсервных заводах.
Исследуемые технологические процессы и материалы | Исследуемые объекты | Название анализа | Откуда берут пробу | Периодичность контроля | Разведения |
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 |
Санитарно-гигиеническое состояние производства | Воздух | КМАФАнМ | Из производственных помещений, сырохранилищ, подвалов, складов, из заквасочной | 1 раз в месяц | |
Количество дрожжей и плесневых грибов | Из производственных помещений, сырохранилищ, подвалов, складов, из заквасочной | 1 раз в месяц | |||
Вода | КМАФАнМ | Из кранах в цехах, из водоисточника | 1 раз в месяц | ||
БГКП | Из кранах в цехах, из водоисточника | 1 раз в месяц |
Работа 6. Количественный и качественный учет микрофлоры воды и воздуха.
Содержание работы: приобретение навыков учета колоний микроорганизмов на плотной среде, умение давать оценку качества воды и воздуха по микробиологическим показателям.
Оборудование, приборы и материалы: Чашки Петри с выросшими колониями микроорганизмов на КМАФАнМ; пробирки 6 шт., колбы 3 шт. с посевами на питательную среду ГПС; таблица для определения коли - титра и коли - индекса воды; чашки Петри с выросшими колониями микроорганизмов на ДП; таблица санитарного состояния воздуха помещений; все для мойки и дезинфекции посуды; все необходимое для окрашивания препарата; лупы; микроскоп.
До занятия студент должен знать:
Методику микробиологического анализа воды и воздуха. По каким показателям судят о наличие кишечной палочки в посевах на ГПС. Как определить титр кишечной палочки. Что такое бродильный титр, коли – титр, коли – индекс. Требования, предъявляемые к питьевой воде по микробиологическим показателям. Какая оценка воздуха дается по микробиологическим показателям.Выполнение работы:
Произвести подсчет общего числа выросших колоний на КМАФАнМ посева воды. Определить титр кишечной палочки. Дать оценку качества питьевой воды по микробиологическим показателям. Произвести подсчет числа выросших колоний на КМАФАнМ посева воздуха. Произвести подсчет дрожжей и плесневых грибов на ДП в воздухе. Дать оценку санитарно-гигиенического состояния воздуха исследуемого помещения, пользуясь таблицей оценки санитарно-гигиенического состояния воздуха. По окончании работы вымыть посуду и сдать лаборанту.После выполнения задания студент должен уметь:
1. Подсчитать колонии в чашках Петри.
2. Сделать вывод о соответствии воды требованиям СанПиНа 1.4.2.1074-01 по микробиологическим показателям.
3. Дать оценку воздуха по микробиологическим показателям.
Задание для отчета:
Записать дату проведения, №, наименование, содержание и выполнение работы. Оформить таблицы №1, №2 от предыдущей работы. Записать вывод или заключение по работе.
Вопросы для самопроверки:
Методы подсчета колоний в чашках Петри. Оценка воздуха по микробиологическим показателям. Требования предъявляемые к питьевой воде по микробиологическим показателям.Методы исследования
Методика подсчета колоний.
При большом росте дно чашки Петри разделить на сектора и провести подсчет в 3-4 секторах. Найти среднее арифметическое и умножить на число секторов.
При посеве разведений (для воды и молока) умножить на разведение.
Например.
1 сектор – 20 колоний
2 сектор – 5 колоний
3 сектор – 12 колоний
Ср. ариф. = 20+5+12/3 = 12,3
12,3*8 = 98 колоний
Определение индекса бактерий группы кишечных палочек при исследовании 333 см3 воды.
Количество положительных результатов анализа воды из | Коли – индекс | Коли – титр | ||
3-х объемов по 100 см3 | 3-х пробирок по 10 см3 | 3-х пробирок по 1 см3 | ||
0 | 0 | 0 | Меньше 3 | Меньше 333 |
0 | 0 | 1 | 3 | 333 |
0 | 1 | 1 | 3 | 333 |
1 | 0 | 0 | 4 | 250 |
1 | 0 | 1 | 7 | 143 |
1 | 1 | 0 | 7 | 143 |
1 | 1 | 1 | 11 | 91 |
1 | 2 | 0 | 11 | 91 |
2 | 0 | 0 | 9 | 111 |
2 | 0 | 1 | 14 | 72 |
2 | 1 | 0 | 15 | 67 |
2 | 1 | 1 | 20 | 50 |
2 | 2 | 0 | 21 | 48 |
2 | 2 | 1 | 28 | 86 |
3 | 0 | 0 | 23 | 43 |
3 | 0 | 1 | 39 | 26 |
3 | 0 | 2 | 64 | 16 |
3 | 1 | 0 | 43 | 23 |
3 | 1 | 1 | 75 | 13 |
3 | 1 | 2 | 120 | 8 |
3 | 2 | 0 | 93 | 17 |
3 | 2 | 1 | 150 | 7 |
3 | 2 | 2 | 210 | 5 |
3 | 3 | 0 | 240 | 4 |
3 | 3 | 1 | 460 | 2 |
3 | 3 | 2 | 1100 | 0,9 |
3 | 3 | 3 | Больше 1100 | Меньше 0,9 |
Примерные микробиологические показатели для оценки воздуха помещений
Объект анализа | Оценка | ||||||||
Отлично | Хорошо | Удовлетворительно | |||||||
Кол-во бактерий | Кол-во плесневых грибов | Кол-во дрожжей | Кол-во бактерий | Кол-во плесневых грибов | Кол-во дрожжей | Кол-во бактерий | Кол-во плесневых грибов | Кол-во дрожжей | |
Воздух цеховых помещений предприятий | до 20 | - | - | 30-50 | до 5 | до 5 | 50-70 | до 5 | до 5 |
Воздух остальных помещений предприятий | до 30 | до 5 | - | 30-70 | 5-10 | до 5 | 70-100 | 10-15 | 5-10 |
 |
Библиографический список.
1. Степаненко молока и молочных продуктов, Сергиев Посад: для Вас –Подмосковье, 1999.
2. Степаненко к лабораторным занятиям по микробиологии молока и молочных продуктов _ Учебное пособие: Сергиев Посад: для Вас –Подмосковье, 1999.
3. , , Микробиологические основы молочного производства –М.: Агропромиздат, 1987.
4. Васильев и противоэпидемическое обеспечение производства молока и молочных продуктов М.: Агропромиздат, 1999.
5. Степаненко молока и молочных продуктов. – М.: Колос, 1996.
6. Инструкция по микробиологическому контролю производства на предприятиях молочной промышленности. Госагропром 1988.
7. Вода питьевая. Гигиенические требования к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Санитарные правила и нормативы. СанПин, 1.4.2.1074- 01
8. , «Санитарная микробиология молока и молочных продуктов», М.: Пищевая промышленность, 1980.
9. , , Казанцева практикум по микробиологии. М.: Легкая и пищевая промышленность,1982.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 |
